Vă mulțumim că ați vizitat Nature.com. Versiunea de browser pe care o utilizați are suport limitat pentru CSS. Pentru cele mai bune rezultate, vă recomandăm să utilizați un browser mai nou (sau să dezactivați modul de compatibilitate în Internet Explorer). Între timp, pentru a asigura suport continuu, vom afișa site-ul fără stiluri și JavaScript.
Stabilirea modelelor animale de schimbare modică (MC) este o bază importantă pentru studiul MC. Cincizeci și patru de iepuri albi din Noua Zeelandă au fost împărțiți în grup de operație simulată, grup de implantare musculară (grupul ME) și grup de implantare a nucleului pulpos (grup NPE). În grupul NPE, discul intervertebral a fost expus prin abord chirurgical lombar anterolateral și a fost folosit un ac pentru a perfora corpul vertebral L5 în apropierea plăcii de capăt. NP a fost extras din discul intervertebral L1/2 cu o seringă și injectat în acesta. Forarea unei gauri în osul subcondral. Procedurile chirurgicale și metodele de foraj în grupul cu implantare musculară și grupul cu operație simulată au fost aceleași cu cele din grupul cu implantare NP. În grupul ME, o bucată de mușchi a fost introdusă în gaură, în timp ce în grupul de operație simulată, nimic nu a fost plasat în gaură. După operație, au fost efectuate scanări RMN și testare biologică moleculară. Semnalul în grupul NPE s-a schimbat, dar nu a existat o schimbare evidentă a semnalului în grupul cu operație simulată și în grupul ME. Observația histologică a arătat că proliferarea anormală a țesuturilor a fost observată la locul de implantare, iar expresia IL-4, IL-17 și IFN-γ a fost crescută în grupul NPE. Implantarea NP în osul subcondral poate forma un model animal de MC.
Modificările modice (MC) sunt leziuni ale plăcilor terminale vertebrale și ale măduvei osoase adiacente vizibile la imagistica prin rezonanță magnetică (RMN). Sunt destul de frecvente la indivizii cu simptome asociate1. Multe studii au subliniat importanța MC datorită asocierii sale cu durerea lombară (LBP)2,3. de Roos et al.4 și Modic și colab.5 au descris mai întâi în mod independent trei tipuri diferite de anomalii ale semnalului subcondral în măduva osoasă vertebrală. Modificările modice de tip I sunt hipointense pe secvențele ponderate T1 (T1W) și hiperintense pe secvențele ponderate T2 (T2W). Această leziune dezvăluie plăcile terminale de fisuri și țesutul de granulație vascular adiacent în măduva osoasă. Modificările de tip II Modic arată semnal ridicat atât pe secvențele T1W, cât și pe T2W. În acest tip de leziune se poate întâlni distrugerea plăcii terminale, precum și înlocuirea histologică grasă a măduvei osoase adiacente. Modificările Modic de tip III arată semnal scăzut în secvențele T1W și T2W. Au fost observate leziuni sclerotice corespunzătoare plăcilor terminale6. MC este considerată o boală patologică a coloanei vertebrale și este strâns asociată cu multe boli degenerative ale coloanei vertebrale7,8,9.
Având în vedere datele disponibile, mai multe studii au oferit perspective detaliate asupra etiologiei și mecanismelor patologice ale MC. Albert şi colab. a sugerat că MC poate fi cauzată de hernia de disc8. Hu şi colab. atribuit MC degenerescerii severe ale discului10. Kroc a propus conceptul de „ruptură internă a discului”, care afirmă că traumele discului repetitive pot duce la microrupturi în placa terminală. După formarea despicăturii, distrugerea plăcii terminale de către nucleul pulpos (NP) poate declanșa un răspuns autoimun, care duce în continuare la dezvoltarea MC11. Ma și colab. a împărtășit o viziune similară și a raportat că autoimunitatea indusă de NP joacă un rol cheie în patogeneza MC12.
Celulele sistemului imunitar, în special limfocitele CD4+ T helper, joacă un rol critic în patogenia autoimunității13. Subsetul Th17 descoperit recent produce citokină proinflamatoare IL-17, promovează expresia chemokinelor și stimulează celulele T din organele afectate pentru a produce IFN-γ14. Celulele Th2 joacă, de asemenea, un rol unic în patogeneza răspunsurilor imune. Exprimarea IL-4 ca celulă Th2 reprezentativă poate duce la consecințe imunopatologice severe15.
Deși multe studii clinice au fost efectuate pe MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, există încă o lipsă de modele experimentale animale adecvate care să poată imita procesul MC care apare frecvent la om și poate fi folosit pentru a investiga etiologia sau tratamente noi, cum ar fi terapia țintită. Până în prezent, doar câteva modele animale de MC au fost raportate pentru a studia mecanismele patologice subiacente.
Pe baza teoriei autoimune propuse de Albert și Ma, acest studiu a stabilit un model de MC de iepure simplu și reproductibil prin autotransplantarea NP în apropierea plăcii de capăt vertebrale forate. Alte obiective sunt observarea caracteristicilor histologice ale modelelor animale și evaluarea mecanismelor specifice ale NP în dezvoltarea MC. În acest scop, folosim tehnici precum biologia moleculară, RMN și studii histologice pentru a studia progresia MC.
Doi iepuri au murit din cauza sângerării în timpul intervenției chirurgicale, iar patru iepuri au murit în timpul anesteziei în timpul RMN. Restul de 48 de iepuri au supraviețuit și nu au prezentat semne comportamentale sau neurologice după operație.
RMN-ul arată că intensitatea semnalului țesutului încorporat în diferite găuri este diferită. Intensitatea semnalului corpului vertebral L5 din grupul NPE s-a schimbat treptat la 12, 16 și 20 de săptămâni după inserție (secvența T1W a arătat semnal scăzut, iar secvența T2W a arătat semnal mixt plus semnal scăzut) (Fig. 1C), în timp ce apare RMN-ul din celelalte două grupuri de părți încorporate au rămas relativ stabile în aceeași perioadă (Fig. 1A, B).
(A) RMN-uri secvențiale reprezentative ale coloanei lombare a iepurelui la 3 momente. Nu s-au găsit anomalii de semnal în imaginile grupului de operație simulată. (B) Caracteristicile semnalului corpului vertebral din grupul ME sunt similare cu cele din grupul de operație simulată și nu se observă nicio modificare semnificativă a semnalului la locul de încorporare în timp. (C) În grupul NPE, semnalul scăzut este clar vizibil în secvența T1W, iar semnalul mixt și semnalul scăzut sunt clar vizibile în secvența T2W. Din perioada de 12 săptămâni până în perioada de 20 de săptămâni, semnalele sporadice înalte care înconjoară semnalele joase din secvența T2W scad.
Hiperplazia osoasă evidentă poate fi observată la locul de implantare a corpului vertebral în grupul NPE, iar hiperplazia osoasă apare mai rapid de la 12 la 20 de săptămâni (Fig. 2C) în comparație cu grupul NPE, nu se observă nicio modificare semnificativă la modelul vertebral. corpuri; Grupul simulat și grupul ME (Fig. 2C) 2A, B).
(A) Suprafața corpului vertebral la porțiunea implantată este foarte netedă, gaura se vindecă bine și nu există hiperplazie în corpul vertebral. (B) Forma locului implantat în grupul ME este similară cu cea din grupul de operație simulată și nu există nicio modificare evidentă a aspectului locului implantat în timp. (C) Hiperplazia osoasă a apărut la locul implantat în grupul NPE. Hiperplazia osoasa a crescut rapid si chiar sa extins prin discul intervertebral pana la corpul vertebral contralateral.
Analiza histologică oferă informații mai detaliate despre formarea osului. Figura 3 prezintă fotografiile secțiunilor postoperatorii colorate cu H&E. În grupul cu operație simulată, condrocitele au fost bine aranjate și nu a fost detectată nicio proliferare celulară (Fig. 3A). Situația din grupul ME a fost similară cu cea din grupul cu operație simulată (Fig. 3B). Cu toate acestea, în grupul NPE, un număr mare de condrocite și proliferarea celulelor asemănătoare NP au fost observate la locul de implantare (Fig. 3C);
(A) Trabeculele pot fi văzute în apropierea plăcii de capăt, condrocitele sunt ordonate cu mărime și formă uniformă a celulei și fără proliferare (de 40 de ori). (B) Starea locului de implantare în grupul ME este similară cu cea a grupului simulat. Pot fi observate trabecule și condrocite, dar nu există o proliferare evidentă la locul de implantare (de 40 de ori). (B) Se poate observa că condrocitele și celulele asemănătoare NP proliferează semnificativ, iar forma și dimensiunea condrocitelor sunt inegale (de 40 de ori).
Expresia ARNm de interleukină 4 (IL-4), ARNm de interleukină 17 (IL-17) și ARNm de interferon y (IFN-y) au fost observate în ambele grupuri NPE și ME. Când au fost comparate nivelurile de expresie ale genelor țintă, expresiile genice ale IL-4, IL-17 și IFN-γ au fost semnificativ crescute în grupul NPE în comparație cu cele din grupul ME și grupul cu operație simulată (Fig. 4) (P < 0,05). În comparație cu grupul de operație simulată, nivelurile de expresie ale IL-4, IL-17 și IFN-γ în grupul ME au crescut doar ușor și nu au atins modificarea statistică (P > 0,05).
Expresia ARNm a IL-4, IL-17 și IFN-y în grupul NPE a arătat o tendință semnificativ mai mare decât cei din grupul cu operație simulată și grupul ME (P <0,05).
În schimb, nivelurile de expresie din grupul ME nu au arătat nicio diferență semnificativă (P>0,05).
Analiza Western blot a fost efectuată utilizând anticorpi disponibili comercial împotriva IL-4 și IL-17 pentru a confirma modelul de expresie al ARNm modificat. După cum se arată în figurile 5A, B, în comparație cu grupul ME și grupul cu operație simulată, nivelurile de proteine de IL-4 și IL-17 din grupul NPE au fost semnificativ crescute (P <0,05). În comparație cu grupul de operație simulată, nivelurile de proteine ale IL-4 și IL-17 din grupul ME nu au reușit să atingă modificări semnificative statistic (P> 0,05).
(A) Nivelurile de proteine ale IL-4 și IL-17 în grupul NPE au fost semnificativ mai mari decât cele din grupul ME și grupul placebo (P <0,05). (B) Histograma Western blot.
Datorită numărului limitat de probe umane obținute în timpul intervenției chirurgicale, studiile clare și detaliate asupra patogenezei MC sunt oarecum dificile. Am încercat să stabilim un model animal de MC pentru a studia mecanismele sale patologice potențiale. În același timp, evaluarea radiologică, evaluarea histologică și evaluarea biologică moleculară au fost utilizate pentru a urmări cursul MC indus de autogrefa NP. Ca rezultat, modelul de implantare NP a dus la o schimbare treptată a intensității semnalului de la puncte de timp de 12 săptămâni la 20 de săptămâni (semnal scăzut mixt în secvențele T1W și semnal scăzut în secvențele T2W), indicând modificări tisulare și histologice și moleculare. evaluările biologice au confirmat rezultatele studiului radiologic.
Rezultatele acestui experiment arată că au avut loc modificări vizuale și histologice la locul leziunii corpului vertebral în grupul NPE. În același timp, s-a observat expresia genelor IL-4, IL-17 și IFN-γ, precum și a IL-4, IL-17 și IFN-γ, indicând că lezarea țesutului nucleului pulpos autolog la nivelul vertebral. organismul poate provoca o serie de modificări de semnal și morfologice. Este ușor de constatat că caracteristicile de semnal ale corpurilor vertebrale ale modelului animal (semnal scăzut în secvența T1W, semnal mixt și semnal scăzut în secvența T2W) sunt foarte asemănătoare cu cele ale celulelor vertebrale umane, iar caracteristicile RMN, de asemenea, confirmă observațiile de histologie și anatomie grosieră, adică modificările în celulele corpului vertebral sunt progresive. Deși răspunsul inflamator cauzat de trauma acută poate apărea la scurt timp după puncție, rezultatele RMN au arătat că schimbările de semnal în creștere progresivă au apărut la 12 săptămâni după puncție și au persistat până la 20 de săptămâni fără niciun semn de recuperare sau inversare a modificărilor IRM. Aceste rezultate sugerează că NP vertebrală autolog este o metodă fiabilă pentru stabilirea MV progresivă la iepuri.
Acest model de puncție necesită abilități adecvate, timp și efort chirurgical. În experimentele preliminare, disecția sau stimularea excesivă a structurilor ligamentare paravertebrale poate duce la formarea osteofitelor vertebrale. Trebuie avut grijă să nu deteriorați sau să iritați discurile adiacente. Deoarece adâncimea de penetrare trebuie controlată pentru a obține rezultate consistente și reproductibile, am realizat manual un dop prin tăierea tecii unui ac de 3 mm lungime. Folosirea acestui dop asigură o adâncime uniformă de foraj în corpul vertebral. În experimentele preliminare, trei chirurgi ortopedici implicați în operație au găsit ace de calibrul 16 mai ușor de lucrat decât acele de calibrul 18 sau alte metode. Pentru a evita sângerarea excesivă în timpul găuririi, ținerea aculului nemișcat pentru o perioadă va oferi o gaură de inserție mai potrivită, sugerând că un anumit grad de MC poate fi controlat în acest fel.
Deși multe studii au vizat MC, se cunosc puține despre etiologia și patogeneza MC25,26,27. Pe baza studiilor noastre anterioare, am descoperit că autoimunitatea joacă un rol cheie în apariția și dezvoltarea MC12. Acest studiu a examinat expresia cantitativă a IL-4, IL-17 și IFN-γ, care sunt principalele căi de diferențiere a celulelor CD4+ după stimularea antigenului. În studiul nostru, în comparație cu grupul negativ, grupul NPE a avut o expresie mai mare a IL-4, IL-17 și IFN-γ, iar nivelurile de proteine ale IL-4 și IL-17 au fost, de asemenea, mai mari.
Din punct de vedere clinic, expresia ARNm a IL-17 este crescută în celulele NP de la pacienții cu hernie de disc28. Niveluri crescute de exprimare a IL-4 și IFN-γ au fost, de asemenea, găsite într-un model de hernie de disc acută necompresivă în comparație cu martorii sănătoși29. IL-17 joacă un rol cheie în inflamație, leziuni tisulare în bolile autoimune30 și îmbunătățește răspunsul imun la IFN-γ31. Leziuni tisulare crescute mediate de IL-17 a fost raportată la șoareci MRL/lpr32 și șoareci susceptibili la autoimunitate33. IL-4 poate inhiba expresia citokinelor proinflamatorii (cum ar fi IL-1β și TNFα) și activarea macrofagelor34. Sa raportat că expresia ARNm a IL-4 a fost diferită în grupul NPE în comparație cu IL-17 și IFN-y în același moment; Expresia ARNm a IFN-y în grupul NPE a fost semnificativ mai mare decât în celelalte grupuri. Prin urmare, producția de IFN-y poate fi un mediator al răspunsului inflamator indus de intercalarea NP. Studiile au arătat că IFN-γ este produs de mai multe tipuri de celule, inclusiv celulele T helper de tip 1 activate, celulele ucigașe naturale și macrofagele35,36 și este o citokină proinflamatoare cheie care promovează răspunsurile imune37.
Acest studiu sugerează că răspunsul autoimun poate fi implicat în apariția și dezvoltarea MC. Luoma și colab. a constatat că caracteristicile semnalului MC și ale NP proeminente sunt similare la RMN și ambele arată un semnal ridicat în secvența T2W38. S-a confirmat că unele citokine sunt strâns asociate cu apariția MC, cum ar fi IL-139. Ma și colab. a sugerat că proeminența în sus sau în jos a NP poate avea o mare influență asupra apariției și dezvoltării MC12. Bobechko40 și Herzbein și colab.41 au raportat că NP este un țesut imunotolerant care nu poate intra în circulația vasculară de la naștere. Proeminențele NP introduc corpi străini în alimentarea cu sânge, mediand astfel reacțiile autoimune locale42. Reacțiile autoimune pot induce un număr mare de factori imuni, iar atunci când acești factori sunt expuși în mod continuu la țesuturi, pot provoca modificări ale semnalizării43. În acest studiu, supraexprimarea IL-4, IL-17 și IFN-γ sunt factori imuni tipici, demonstrând în continuare relația strânsă dintre NP și MCs44. Acest model animal imită bine descoperirea NP și intrarea în placa de capăt. Acest proces a dezvăluit în continuare impactul autoimunității asupra MC.
După cum era de așteptat, acest model animal ne oferă o posibilă platformă pentru a studia MC. Cu toate acestea, acest model are încă unele limitări: în primul rând, în timpul fazei de observare a animalelor, unii iepuri din stadiul intermediar trebuie eutanasiați pentru teste histologice și de biologie moleculară, astfel încât unele animale „căd din uz” în timp. În al doilea rând, deși în acest studiu sunt stabilite trei momente de timp, din păcate, am modelat doar un singur tip de MC (modic tip I schimbare), așa că nu este suficient să reprezinte procesul de dezvoltare a bolii umane și trebuie setate mai multe puncte de timp la mai bine observați toate schimbările semnalului. În al treilea rând, modificările în structura țesutului pot fi într-adevăr arătate în mod clar prin colorarea histologică, dar unele tehnici specializate pot dezvălui mai bine modificările microstructurale din acest model. De exemplu, microscopia cu lumină polarizată a fost folosită pentru a analiza formarea fibrocartilajului în discurile intervertebrale de iepure45. Efectele pe termen lung ale NP asupra MC și plăcii terminale necesită studii suplimentare.
Cincizeci și patru de iepuri albi masculi din Noua Zeelandă (greutate aproximativ 2,5-3 kg, vârsta 3-3,5 luni) au fost împărțiți aleatoriu în grup de operație simulată, grup de implantare musculară (grup ME) și grup de implantare rădăcină nervoasă (grup NPE). Toate procedurile experimentale au fost aprobate de Comitetul de etică al Spitalului Tianjin, iar metodele experimentale au fost efectuate în strictă conformitate cu ghidurile aprobate.
Au fost aduse unele îmbunătățiri tehnicii chirurgicale a lui S. Sobajima 46 . Fiecare iepure a fost plasat într-o poziție de decubit lateral și suprafața anterioară a cinci discuri intervertebrale lombare consecutive (IVD) a fost expusă utilizând un abord retroperitoneal posterolateral. Fiecărui iepure i s-a administrat anestezie generală (20% uretan, 5 ml/kg prin vena urechii). S-a făcut o incizie longitudinală a pielii de la marginea inferioară a coastelor până la marginea pelvină, la 2 cm ventral la mușchii paravertebrali. Coloana vertebrală anterolaterală dreaptă de la L1 la L6 a fost expusă prin disecția ascuțită și tocită a țesutului subcutanat supraiacent, a țesutului retroperitoneal și a mușchilor (Fig. 6A). Nivelul discului a fost determinat folosind borul pelvin ca reper anatomic pentru nivelul discului L5-L6. Utilizați un ac de perforare de calibrul 16 pentru a găuri o gaură în apropierea plăcii de capăt a vertebrei L5 la o adâncime de 3 mm (Fig. 6B). Utilizați o seringă de 5 ml pentru a aspira nucleul pulpos autolog din discul intervertebral L1-L2 (Fig. 6C). Îndepărtați nucleul pulpos sau mușchiul în funcție de cerințele fiecărui grup. După adâncirea găurii, se pun suturi absorbabile pe fascia profundă, fascia superficială și piele, având grijă să nu se deterioreze țesutul periostal al corpului vertebral în timpul intervenției chirurgicale.
(A) Discul L5-L6 este expus printr-un abord retroperitoneal posterolateral. (B) Folosiți un ac de calibrul 16 pentru a găuri o gaură în apropierea plăcii de capăt L5. (C) MF autologe sunt recoltate.
Anestezia generală a fost administrată cu uretan 20% (5 ml/kg) administrat prin vena urechii, iar radiografiile coloanei lombare au fost repetate la 12, 16 și 20 de săptămâni postoperator.
Iepurii au fost sacrificați prin injecție intramusculară de ketamina (25,0 mg/kg) și pentobarbital de sodiu intravenos (1,2 g/kg) la 12, 16 și 20 de săptămâni după operație. Toată coloana vertebrală a fost îndepărtată pentru analiză histologică și a fost efectuată o analiză reală. Transcripția inversă cantitativă (RT-qPCR) și Western blot au fost utilizate pentru a detecta modificările factorilor imunitari.
Examinările RMN au fost efectuate la iepuri folosind un magnet clinic de 3,0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) echipat cu un receptor de bobină ortogonală a membrelor. Iepurii au fost anesteziați cu uretan 20% (5 ml/kg) prin vena urechii și apoi plasați în decubit dorsal în magnet, cu regiunea lombară centrată pe o bobină de suprafață circulară cu diametrul de 5 inchi (GE Medical Systems). Imaginile de localizare coronale ponderate T2 (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) au fost obținute pentru a defini locația discului lombar de la L3-L4 la L5-L6. Secțiunile ponderate T2 în plan sagital au fost achiziționate cu următoarele setări: secvență rapidă spin-ecou cu un timp de repetiție (TR) de 2200 ms și un timp de ecou (TE) de 70 ms, matrice; câmp vizual de 260 și opt stimuli; Grosimea de tăiere a fost de 2 mm, distanța a fost de 0,2 mm.
După ce ultima fotografie a fost făcută și ultimul iepure a fost ucis, discurile simulate, încorporate în mușchi și NP au fost îndepărtate pentru examinare histologică. Țesuturile au fost fixate în formol tamponat neutru 10% timp de 1 săptămână, decalcificate cu acid etilendiaminotetraacetic și secţionate cu parafină. Blocurile de țesut au fost încorporate în parafină și tăiate în secțiuni sagitale (5 μm grosime) folosind un microtom. Secțiunile au fost colorate cu hematoxilină și eozină (H&E).
După colectarea discurilor intervertebrale de la iepurii din fiecare grup, ARN-ul total a fost extras folosind o coloană UNIQ-10 (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., China) conform instrucțiunilor producătorului și un sistem de transcripție inversă ImProm II (Promega Inc. , Madison, WI, SUA). S-a efectuat transcrierea inversă.
RT-qPCR a fost efectuată utilizând un Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., SUA) și SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SUA) conform instrucțiunilor producătorului. Volumul de reacție PCR a fost de 20 μl și conținea 1,5 μl de ADNc diluat și 0,2 μM din fiecare primer. Primerii au fost proiectați de OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA) și fabricați de Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (China) (Tabelul 1). Au fost utilizate următoarele condiții de ciclizare termică: etapa inițială de activare a polimerazei la 94°C timp de 2 minute, apoi 40 de cicluri a câte 15 s fiecare la 94°C pentru denaturarea șablonului, recoacere timp de 1 min la 60°C, extensie și fluorescență. măsurătorile au fost efectuate timp de 1 min la 72°C. Toate probele au fost amplificate de trei ori și valoarea medie a fost utilizată pentru analiza RT-qPCR. Datele de amplificare au fost analizate folosind FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, SUA). Expresia genelor IL-4, IL-17 și IFN-y au fost normalizate la controlul endogen (ACTB). Nivelurile relative de expresie ale ARNm țintă au fost calculate folosind metoda 2-ΔΔCT.
Proteina totală a fost extrasă din țesuturi folosind un omogenizator de țesut în tampon de liză RIPA (conținând un cocktail inhibitor de protează și fosfatază) și apoi centrifugate la 13.000 rpm timp de 20 de minute la 4°C pentru a îndepărta resturile de țesut. Cincizeci de micrograme de proteină au fost încărcate pe bandă, separate prin SDS-PAGE 10% și apoi transferate pe o membrană PVDF. Blocarea a fost efectuată în lapte uscat fără grăsimi 5% în soluție salină tamponată cu Tris (TBS) care conține 0,1% Tween 20 timp de 1 oră la temperatura camerei. Membrana a fost incubată cu anticorp primar anti-decorină de iepure (diluat 1:200; Boster, Wuhan, China) (diluat 1:200; Bioss, Beijing, China) peste noapte la 4°C şi a reacţionat în a doua zi; cu anticorp secundar (imunoglobulină G de capră anti-iepure la diluție 1:40.000) combinat cu peroxidază de hrean (Boster, Wuhan, China) timp de 1 oră la temperatura camerei. Semnalele Western blot au fost detectate prin chemiluminiscență crescută pe membrana chemiluminiscentă după iradierea cu raze X. Pentru analiza densitometrică, petele au fost scanate și cuantificate folosind software-ul BandScan, iar rezultatele au fost exprimate ca raport dintre imunoreactivitatea genei țintă și imunoreactivitatea tubulinei.
Calculele statistice au fost efectuate folosind pachetul software SPSS16.0 (SPSS, SUA). Datele colectate în timpul studiului au fost exprimate ca medie ± abatere standard (media ± SD) și analizate utilizând analiza de varianță a măsurilor repetate unidirecționale (ANOVA) pentru a determina diferențele dintre cele două grupuri. P < 0,05 a fost considerat semnificativ statistic.
Astfel, stabilirea unui model animal de MC prin implantarea de NP autologe în corpul vertebral și efectuarea de observații macroanatomice, analize RMN, evaluare histologică și analiză biologică moleculară poate deveni un instrument important pentru evaluarea și înțelegerea mecanismelor MC umane și dezvoltarea de noi terapii. interventii.
Cum să citez acest articol: Han, C. et al. Un model animal de modificări Modic a fost stabilit prin implantarea nucleului pulpos autolog în osul subcondral al coloanei lombare. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J. și Boos, N. Imagistica prin rezonanță magnetică a coloanei lombare: prevalența herniei și a retenției de disc, compresia rădăcinii nervoase, anomaliile plăcii terminale și osteoartrita articulației fațete la voluntari asimptomatici . rata. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS și Leboeuf-Eed, K. Modificările Modic și relația lor cu constatările clinice. European Spine Journal: publicația oficială a Societății Europene a Coloanei vertebrale, a Societății Europene de Deformare a Coloanei vertebrale și a Societății Europene pentru Cercetarea Coloanei Cervicale 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., și colab. Modificări modice ale plăcilor terminale vertebrale lombare: prevalență și asociere cu dureri de spate și sciatică la lucrătorii bărbați de vârstă mijlocie. Spine 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K. și Dalinka, M. RMN-ul modificărilor măduvei osoase în apropierea plăcii de capăt în boala degenerativă a coloanei lombare. AJR. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ și Carter, JR Boala degenerativă a discului: evaluarea modificărilor măduvei vertebrale cu RMN. Radiologie 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS și Carter, JR Imagistica bolii degenerative ale discului. Radiologie 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, şi colab. Predictorii plăcii terminale neovertebrale (Modic) semnalează modificări în populația generală. European Spine Journal: Publicația oficială a Societății Europene a Coloanei vertebrale, a Societății Europene de Deformare a Coloanei vertebrale și a Societății Europene pentru Cercetarea Coloanei Cervicale, Divizia 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
Albert, HB și Mannisch, K. Modificări Modic după hernia de disc lombară. European Spine Journal: Publicația oficială a Societății Europene a Coloanei vertebrale, a Societății Europene de Deformare a Coloanei vertebrale și a Societății Europene pentru Cercetarea Coloanei Cervicale 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M. și Kaapa, E. Modificările Modic de tip I pot prezice degenerarea discului deformațional rapid progresiv: un studiu prospectiv de 1 an. European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ și Fan, SW Modificări Modic: posibile cauze și contribuție la degenerarea discului lombar. Ipoteze medicale 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Ruptura discului intern. Probleme de prolaps de disc peste 50 de ani. Spine (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Ora postării: 13-12-2024